《吸血鬼骑士》根据由漫画家樋野茉理所绘画的同名少女漫画所改编。
黑主学院是一所有名的私立学校，分为普通部和夜间部。夜间部人员都是有超美型的精英学员。但他们有个特殊的身份：吸血鬼！并且这个身份不能让普通部学生知道。理事长的义女——普通部学生的黑主优姬，以及青梅竹马的锥生零担负起学院守护者的职责——处理人类学生与吸血鬼接触时所出现的麻烦。而在零的内心深处，因为4年前父母被杀害而痛恨着所有吸血鬼。
十年前的一个雪夜优姬迷路遭遇恶鬼，幸得贵族吸血鬼玖兰枢所救。十年后，两人在黑主学院再次相遇。对于救过自己性命的枢，优姬心中存着感激与仰慕，枢虽对优姬有好感，但却因种族间的鸿沟刻意远离。而零虽对优姬也有感觉，但坚硬的内心却阻止了他的感情。等待着他们的命运到底是什么......

相原琴子（水树奈奈 配音）是一个各方面都非常普通的女子高中生，刚刚升上高中的时候，她对在学校有着极高人气的校草级帅哥入江直树（平川大辅 配音）一见钟情，而如今已经是一名准毕业生的她和直树之间依然有着非常遥远的距离。难道这样的状况要一直持续到毕业吗？焦急的琴子不管不顾的递出了情书。没想到，直树连看没看就残酷的拒绝了琴子的表白。
失落的琴子回到家中，当晚发生了大地震，琴子的家在地震中毁于一旦。父亲重雄（岛田敏 配音）将琴子托付给了自己的好友，没想到这名好友居然就是直树的父亲！就这样，琴子和朝思暮想的直树开始了同居生活，而在朝夕相处中，直树是否会对琴子的印象有所改观呢？