大都会，人来人往的广场，行色匆匆的路人。伴随着此起彼落的吸气声，有人摸出手机，有人掏出照相机，一间透明玻璃房子被里三层外三层围了个水泄不通。玻璃房子的空间不大，里面架着一台用电锯制成的古怪器具。被链子拷在它两端的，是两个似乎毫无知觉的大老爷们儿。“我想和你们玩个游戏。”一个熟悉的声音幽幽响起。面面相觑的人群很快会发现，光天化日众目睽睽之下，残杀即将发生，这一切并不是动物园看马戏……

“竖锯”约翰•克莱默（Tobin Bell 饰）肉体虽死，但精神长存。这一次，某医疗保险公司的老总威廉•伊斯顿（Peter Outerbridge 饰）成为他狩猎和考验的目标。威廉贪婪狡诈，他发明了一套医保的计算公式，同时凭借爪牙的协助，成功向无数病入膏肓的人们拒保，从中赚取黑心钱财。然而他没有想到，自己有朝一日也要将生命的决定权交与别人手中。他必须按照“竖锯”的游戏规则，小心翼翼寻找逃生之路。
另一方面，约翰门徒之一马克•霍夫曼（Costas Mandylor 饰）成功害死警官斯特朗，并试图将警方的注意力引到斯特朗身上来。然而种种迹象早已令同侪对马克的身份产生怀疑，他的身份即将被揭穿，而他违背约翰精神的暴力之路也慢慢走向尽头……

远离尘嚣的一座封闭谷仓内，安娜（劳拉·范德沃特 Laura Vandervoort 饰）、赖安（保罗·布朗斯坦 Paul Braunstein 饰）、米奇（曼德拉·范·皮布尔斯 Mandela Van Peebles 饰）和卡莉（布列塔尼·艾伦 Brittany Allen 饰）从昏迷中醒来。他们的头部被奇怪的装置束缚，颈上的铁链连接着安装了圆锯的铁门。在竖锯的指示下，他们将经历一场场痛彻骨髓的生死考验，并在死神的屠刀面前低头认罪。
繁华都市中，以各种方式惨死的尸体接连出现，共同特征全部指向了拼图杀人案的制造者——本该在十年前死去的竖锯约翰·克莱默（托宾·贝尔 Tobin Bell 饰）。竖锯不死，给予背德者以至痛的责罚和审判……