大都会，人来人往的广场，行色匆匆的路人。伴随着此起彼落的吸气声，有人摸出手机，有人掏出照相机，一间透明玻璃房子被里三层外三层围了个水泄不通。玻璃房子的空间不大，里面架着一台用电锯制成的古怪器具。被链子拷在它两端的，是两个似乎毫无知觉的大老爷们儿。“我想和你们玩个游戏。”一个熟悉的声音幽幽响起。面面相觑的人群很快会发现，光天化日众目睽睽之下，残杀即将发生，这一切并不是动物园看马戏……

“竖锯”约翰•克莱默（Tobin Bell 饰）肉体虽死，但精神长存。这一次，某医疗保险公司的老总威廉•伊斯顿（Peter Outerbridge 饰）成为他狩猎和考验的目标。威廉贪婪狡诈，他发明了一套医保的计算公式，同时凭借爪牙的协助，成功向无数病入膏肓的人们拒保，从中赚取黑心钱财。然而他没有想到，自己有朝一日也要将生命的决定权交与别人手中。他必须按照“竖锯”的游戏规则，小心翼翼寻找逃生之路。
另一方面，约翰门徒之一马克•霍夫曼（Costas Mandylor 饰）成功害死警官斯特朗，并试图将警方的注意力引到斯特朗身上来。然而种种迹象早已令同侪对马克的身份产生怀疑，他的身份即将被揭穿，而他违背约翰精神的暴力之路也慢慢走向尽头……