曾经由人类主宰的社会如今变成了吸血鬼的天下，而仅存的人类被圈养起来成为制造新鲜血液的机器。人类的数量越来越少，吸血鬼必须研究出血液的替代品，否则将面临更加恐怖的变异。爱德华·道尔顿（伊桑·霍克 饰）是专门研究新型替代品的首席血液专家，他的老板查尔斯·布罗姆利是一位野心家，他非常满意当前吸血鬼世界的现状并企图通过垄断新的替代品获得巨额利润。一次意外爱德华遇到了逃亡中的人类奥德丽·班尼特（克劳蒂娅·卡万 饰），并帮助她摆脱追捕，不料事后奥德丽居然找上门来，并且带来了在一次意外中由吸血鬼奇迹般变成人类的艾维斯，仅存的人类需要一个可以信任的吸血鬼的帮助……
斯派瑞格兄弟（Peter Spierig & Michael Spierig）在此片中将以往的吸血鬼类型片进行改造，融入科幻的元素打造出全新的故事氛围。

故事紧接第一季最后一集。埃琳娜回到家中后发现叔叔John躺被凯瑟琳刺倒在血泊之中，而杰里米不省人事。在医院里，刚刚遭遇车祸的卡罗琳正在接受抢救，马特、邦妮和达蒙一同安慰心急如焚的福布斯警长。埃琳娜与达蒙谈起了当天晚上的种种怪事，包括他们那一吻。当埃琳娜坚决否认此事后，达蒙敏锐地意识到凯瑟琳已经回来了。凯瑟琳的回归让斯特凡和达蒙十分担心，他们开始调查凯瑟琳的行踪，希望能查到她的真实目的。他们都不希望凯瑟琳威胁到他们已经建立起来的「生活」。与此同时，泰勒仍在为父亲的死伤心难过。叔叔Mason Lockwood的突然回归给了他一个惊喜。Mason打算回家料理哥哥的后事，并帮助泰勒渡过难关。Mason已经掌握了控制狼人怒气的方法，他希望将这种方法传授给泰勒，然而泰勒却不一定能接受自己是狼人的现实。另一方面，Mason和达蒙相处得很不愉快。尽管Mason是个好人，可他一旦被达蒙逼急了，也会做出令人震惊的事情来。

《吸血鬼日记》由美国女作家L.J.史密斯的同名畅销系列小说改编而成。
父母遭遇车祸，Elena（妮娜·杜波夫 Nina Dobrev 饰）和弟弟Jeremy搬去与唯一的监护人阿姨Jenna一起生活。在好友Bonnie、Caroline的帮助下，Elena的生活步入正轨， 而Jeremy则用毒品来麻痹内心的伤痛。新学期开始，学校来一个英俊的转校生Stefan（保罗·韦斯利 Paul Wesley 饰），他和Elena彼此一见倾心，但心底也埋藏着一个黑暗的惊天秘密——他是个吸血鬼。在Elena还不能完全接受真相时，Stefan的吸血鬼哥哥Damon（伊恩·萨默海尔德 Ian Somerhalder 饰）也不期而至，而他的出现也带着不可告人的目的。此时Bonnie也告诉Elena一个秘密——她其实是一个女巫。吸血鬼、女巫，平静的小镇生活即将被打破......

第三季开始的剧情不会如第二季第一集延续第一季最后一集的内容，会从吸血鬼始祖克劳斯及相关人物介绍回顾故事发展，再转回延续第二季的内容，并且尼克劳斯和Elijah兄弟还会回来。第三季的第一集就是女主角埃琳娜的18岁生日。这一季中埃琳娜会升到高中三年级，但是这一季结束的时候不会毕业。随着第三季开始，泰勒和卡罗琳之间的友谊就会开花结果，迸发出爱情。

在一个清晨的早上，埃琳娜在晨跑，发现自己被人跟踪，慌乱中想甩掉这个人，却被撞个正脸，那个男孩向埃琳娜道歉没有看到路。埃琳娜把事情告诉了邦妮觉得自己开始疑神疑鬼。邦妮和埃琳娜讨论着一直没有克劳斯的动静，而邦妮一直做着同一个噩梦，感到很不安。达蒙仍然像以前一样，过着纸醉金迷的生活。在酒吧中碰上达蒙的Ric来找在酒吧打工的杰里米，杰里米在这段时间的学习成绩很糟糕，Ric被酒吧的美女服务生告知杰里米早就被炒鱿鱼了。此刻的杰里米正在和泰勒一起练习弩箭、聊天。埃琳娜对杰里米的近况很担心，给杰里米打电话却无人接听。达蒙安慰埃琳娜时，克劳斯带着另一个混血Tony来介绍给埃琳娜和达蒙认识。原来早上跟踪埃琳娜的男孩就是Tony。克劳斯警告埃琳娜他在寻找妹妹还有斯特凡偷走了他的棺材。邦妮来到了梦中的破屋中，发现了斯特凡偷走的棺材，斯特凡要求邦妮帮忙隐藏棺材。邦妮答应了。在另一方，埃琳娜家中，为了泰勒和埃琳娜正在争吵。杰里米把泰勒请到了家中。克劳斯来威胁达蒙，想找到妹妹和棺材，无果。克劳斯打来电话给杰里米。泰勒在此时离开，埃琳娜和Ric发现杰里米脱下戒指不知所踪。在门口看见杰里米，为救杰里米，Ric身受重伤。原来杰里米已经被克劳斯进行了精神控制。埃琳娜又让达蒙故技重施，抹去了杰里米的记忆。

　　复活后的马尔库斯通过吸血获取了关于迈克尔和塞琳娜的记忆，可他的真正目的并不仅仅是杀死他们，而是通过抢夺狼人首领临终时交给塞琳娜的钥匙与她的记忆去寻找封印自己的兄弟，世界上第一只狼人的地方，揭开封印与这只最强的狼人一同，统治整个世界！此时，吸血鬼女英雄塞琳娜与拥有人狼和吸血鬼两种力量的迈克尔毫不顾忌勇往直前，阻止这场阴谋。狰狞的面孔、滴血的獠牙、闪烁寒光的利刃、色欲的迷惑、层层的谜团……都无法阻挡她寻求真相的脚步。

　　在人类之外，有一个黑暗而未知的地下世界，那里活跃着两个敌对种族：具有贵族气质、神秘难以捉摸的吸血鬼，和生性凶残野蛮的狼人，为了获得地下世界的生存统治权，他们争斗了几个世纪。对于人类来说，他们不过是街头巷尾的鬼怪传说，但实际上，双方的激烈对峙从未停息，他们终其一生不断交手，誓有一方倒下不能罢休。

终于有一天，人类向日渐增多的血族和狼族宣战，这两个族群遭到大肆围剿与屠杀，人类取得绝对的优势。塞琳娜（凯特·贝金赛尔 Kate Beckinsale 饰）和约翰也在这场浩劫中遭难，当她再次醒来时，却发现自己被名为抗原研究所的机构囚禁起来，编号实验品1号。她奋力突破了束缚，根据共视的能力在黑暗的都市中寻找实验品2号——约翰。途中她遭遇血族的同伴相助以及狼人的袭击，当她找到被狼人们追逐的实验品2号时却发现，眼前竟是一个从没见过面但有着极为恐怖力量的小女孩——伊薇（英迪娅·埃斯利 India Eisley 饰），而她是血族与狼族的混血儿。
在这个陌生的时代，塞琳娜注定继续过着血雨腥风的生活……